细胞微生物检测员工作总结

发布时间：2025-12-03

细胞微生物检测员工作总结(推荐15篇)。

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说教材：

《寻找微生物》是大象版科学五下教材《形形色色的微生物》单元的第一课。本单元属于综合探究活动单元，本课是这一单元的起始课，旨在通过“食物品尝会”这一活动的导入，引起学生对餐桌上常见到的食物的观察与思考，从而发现问题，进行大胆猜想与假设，再通过对搜集的资料进行阅读、整理、筛选，来验证猜想。最后，得出结论，并交流总结微生物的相关知识，从而对微生物及其与人类的关系有一个整体的认识与了解，为后两节课认识微生物的益处与危害奠定基础。

本课的教学对象是五年级学生，通过两年半的科学课的学习，学生经历了一些较为完整的科学探究活动。已经具备了观察、提问、猜想与自主研究的能力，能够在教师的引导下进行自主探究。同时。本单元涉及的科学知识——微生物对于人的感官来说，多数是看不见也摸不着的，比较抽象，但微生物又与我们的生活息息相关，从这方面来说，更能激发学生的求知欲和好奇心，使学生在课堂上动起来，活跃起来。

说教学目标：

根据上述对教材的简单剖析和对学生的分析，本课的教学目标确定为：

1、能积极提出问题，大胆猜想与假设。在教师指导下，学会搜集资料、验证猜想的方法。

2、意识到重视实验和证据是一种良好的科学态度。

3、知道什么是微生物，以及微生物与人类的关系。

说材料：

教师准备：白萝卜、酸萝卜、白豆腐、霉豆腐、生面团。一次性碗。

多媒体辅助教学课件。

学生准备：面包、一次性筷子（每人一份）

搜集微生物相关知识的资料。

说教学过程：

1、创设情境，激趣导入。

导入部分我充当一个学校餐厅的美食顾问，调查学生都喜欢哪些食物。科学教师被聘为顾问，学校为的是让伙食更加营养丰富，科学合理，这一情境的设计隐藏着学科学就是为了用科学，为了更好地用科学知识来改善我们的生活的意思。在导入中，让学生说出自己喜欢的食物，目的是让学生明白这些食物多数是用蒸、煮、烤、炸、煎的常用方法制作的，搂着再推出一种特制食物让学生品尝，留有悬念，勾起学生品尝的欲望。

2、品尝讨论，发现问题。

“食品品尝会”虽然是本课的导入，出示的食物有的学生可能经常吃，但学生平常没有注意思考与观察我们吃的是不是科学，所以品尝这一看似简单的环节是能否达到教学目标的关键。此环节的重点是让学生学会小组合作学习，要有秩序地品尝，要在品尝的同时仔细认真地观察与思考，体会食物加工前后的一些变化。学生在对比品尝后，就会从中发现问题。

3、提出问题，猜想假设。

学生通过品尝，发现食物加工前和加工后在味道、颜色、浓度等方面有很大的变化，纷纷提出感兴趣的问题。有的想了解酸奶的制作过程，有的想知道腌制泡菜时为什么总要用肚大口小的坛子，有的想了解为什么豆腐制成后会变的咸咸的，软软的，也就是“是什么改变了它们的品质和味道”这一问题，我让学生把各自提出的.问题存入“问题银行”，课后可以对自己特别感兴趣的进行研究。

五年级的同学已经能提出有价值的科学问题，但怎样选择适合各自研究的问题开展研究，仍是一个较难掌握的问题。所以。我在课堂上引导学生对“是什么改变了这些食物的品质和味道”这一问题，组织学生猜想，展开探究。究竟学生猜想的是否正确并不关键，只要学生敢于大胆猜想，我就给予鼓励，这是培养学生独立见解的前提。

4、搜集资料，验证猜想。

关于资料的搜集途径在前几册教材中都有涉及，学生已经基本掌握，本节课的关键是对搜集到的资料进行整理、归纳、汇总、筛选等，找出“是什么改变了它们的品质和味道”这一问题的答案，从而验证各自的猜想。我在课堂上给学生留出充分的时间，让学生从课前搜集的资料中梳理出问题有关键，以解决问题。在学生找到具体的乳酸菌、毛霉菌等细菌后，老师适时总结，说明这些就是微生物，使学生充分感觉到微生物就在我们身边，认识微生物并不陌生，为下一步寻找微生物做好心理上的谁备。

5、阅读资料，寻找微生物

对课本上的资料卡以及学生课前搜集到的关于微生物相关知识的资料进行阅读、理解并不困难，关键在于学生阅读后能把资料上的内容变成自己的东西说出来，在小组内、全班分别进行表达与交流，这正是本册教材所要培养的科学能力的二级目标。这一环节的设计是由“学”到“会”的内化过程，学生充分阅读、交流之后，知道生活中很多地方都有微生物，知道微生物对人类有利也有弊，与人类关系密切，在自主探究中达成了知识、能力、情感的三维目标。

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在生命世界中，各种生物的体形大小相差极大。植物中的红杉高达。

微生物一般指体形在吸收多转化快、生长旺繁殖快、适应强变异频、分布广种类多。

体积小，面积大

微生物的个体极其微小，必须借助显微镜放大几倍、几百倍、上千倍，乃至数万倍才能看清。表示微生物大小的单位是微米（或纳米（。用细菌中的杆菌为例可以形象地说明微生物个体的细小。杆菌的宽度是0.5微米，因此80个杆菌“肩并肩”地排列成横队，也只有一根头发丝的宽度。杆菌的长度约2微米，故1500个杆菌头尾衔接起来仅有一颗芝麻长。

我们知道，把一定体积的物体分割得越小，它们的总表面积就越大，可以把物体的表面积和体积之比称为比表面积。如果把人的比表面积值定为1，则大肠杆菌的比表面积值竟高达30万！这样一个小体积大面积系统是微生物与一切大型生物在许多关键生理特征上的区别所在。

吸收多，转化快

由于微生物的比表面积大得惊人，所以与外界环境的接触面特别大，这非常有利于微生物通过体表吸收营养和排泄废物，就使它们的“胃口”十分庞大。而且，微生物的食谱又非常广泛，凡是动植物能利用的营养，微生物都能利用，大量的动植物不能利用的物质，甚至剧毒的物质，微生物照样可以视为美味佳肴。如大肠杆菌在合适条件下，每小时可以消耗相当于自身重量2000倍的糖，而人要完成这样一个规模则需要40年之久。如果说一个50公斤的人一天吃掉与体重等重的食物，恐怕无人会相信。

我们可以利用微生物这个特性，发挥“微生物工厂”的作用，使大量基质在短时间内转化为大量有用的化工、医药产品或食品，为人类造福，使有害物质化为无害，将不能利用的物质变为植物的肥料。

生长旺，繁殖快

微生物以惊人的速度“生儿育女”。例如大肠杆菌在合适的生长条件下，；经和每日增殖率。

当然，由于种种条件的限制，这种疯狂的繁殖是不可能实现的。细菌数量的翻番只能维持几个小时，不可能无限制地繁殖。因而在培养液中繁殖细菌，它们的数量一般仅能达到每毫升1－10亿个，最多达到100亿。尽管如此，它的繁殖速度仍比高等生物高出千万倍。微生物的这一特性在发酵工业上具有重要意义，可以提高生产效率，缩短发酵周期。适应强，变异频

微生物对环境条件尤其是恶劣的“极端环境”具有惊人的适应力，这是高等生物所无法比拟的。例如，多数细菌能耐几百年甚至上千年。耐酸碱、耐缺氧、耐毒物、抗辐射、抗静水压等特性在微生物中也极为常见。

微生物个体微小，与外界环境的接触面积大，容易受到环境条件的影响而发生性状变化（变异）。尽管变异发生的机会只有百万分之一到百亿分之一，但由于微生物繁殖快，也可在短时间内产生大量变异的后代。正是由于这个特性，人们才能够按照自己的要求不断改良在生产上应用的微生物，如青霉素生产菌的发酵水平由每毫升20单位上升到近10万单位，利用变异和育种得到如此大幅度的`产量提高，在动植物育种工作中简直是不可思议的。

分布广，种类多

虽然我们不借助显微镜就无法看到微生物，可是它在地球上几乎无处不有，无孔不入，就连我们人体的皮肤上，口腔里，甚至肠胃道里，都有许多微生物。的温泉、零下250℃的环境下，均有微生物存在，这些都属极端环境。至于人们正常生产生活的地方，也正是微生物生长生活的适宜条件。因此，人类生活在微生物的汪洋大海之中，但常常是“深在菌中不知菌”。

微生物聚集最多的地方是土壤，土壤是各种微生物生长繁殖的大本营，任意取一把土或一粒土，就是一个微生物世界，不论数量或种类均很多。在肥沃的土壤中，每克土含有20亿个微生物，即使是贫瘠的土壤，每克土中也含有3－5亿个微生物。

空气里悬浮着无数细小的尘埃和水滴，它们是微生物在空气中的藏身之地。哪里的尘埃多，哪里的微生物就多。一般来说，陆地上空比海洋上空的微生物多，城市上空比农村上空多，杂乱肮脏地方的空气里比整洁卫生地方的空气里的多，人烟稠密、家畜家禽聚居地方的空气里的微生物最多。早在60年前我国有一位年轻人，就曾经乘飞机在160米到5300米的高空采集过微生物，发现都有微生物在活动，不过在160米高空的微生物比5300米处要多100倍。

各种水域中也有无数的微生物。居民区附近的河水和浅井水容易受到各种污染，水中的微生物就比较多。大湖和海水中，微生物较少。

从人和动植物的表皮到人和动物的内脏，也都经常生活着大量的微生物。如大肠杆菌在大肠中清理消化不完的食物残渣，所以，在正常情况下，还是人肠道缺少不了的帮手呢！把手放到显微镜下观察，一双普通的手上带有细菌四万到四十万个，即使是一双刚刚用清水洗过的手，上面也有近三百个细菌。人们在握手时，会把许多细菌传播给对方，所以握手也能传播疾病！幸好大多数微生物不是致病菌，否则后果将不堪设想。

微生物种类繁多。迄今为止，我们所知道的微生物约有10万种，有人估计目前已知的种只占地球上实际存在的微生物总数的20%，微生物很可能是地球上物种最多的一类。微生物资源是极其丰富的，但在人类生产和生活中仅开发利用了已发现微生物种数的1%。

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微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文对生长量测定法、微生物计数法、生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。下面是.jinpinTjian ul li a小编为大家带来的微生物检测手段及注意事项的知识，欢迎阅读。

1. 微生物计量法

1.1 体积测量法

又称测菌丝浓度法，通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液(如10 mL)放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间(如5 min)和转速(如5000 rpm)，离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为(10-v)/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。

1.2称干重法

可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10~20%。在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1~5次，进行干燥。干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40 ℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母(Activity Dry Yeast, ADY),一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。

1.3 比浊法

微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。如使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600 nm处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控li的生长及诱导时间。

1.4 菌丝长度测量法

对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度，或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管，到入合适的培养基，卧放，在开口的一端接种微生物，一段时间后记录其菌丝生长长度，借此衡量丝状微生物的生长。

2. 微生物计数法

2.1 血球计数板法

血球计数板是一种有特别结构刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，中央有一短横沟和两个平台，两嵴的表比两平台的表面高0.1 mm，每个平台上刻有不同规格的格网，中央0.1 mm2面积上刻有400个小方格。通过油镜观察，统计一定大格内微生物的数量，即可算出1 mL菌液中所含的菌体数。这种方法简便，直观，快捷，但只适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢子进行计数，并且所得结果是包括死细胞在内的总菌数。

2.2 染色计数法

为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数，而直接用血球计数板法又无法区分死细胞和活细胞的不足，人们发明了染色计数法。借助不同的染料对菌体进行适当的染色，可以更方便的在显微镜下进行活菌计数。如酵母活细胞计数可用美蓝染色液，染色后在显微镜下观察，活细胞为无色，而死细胞为蓝色。

2.3 比例计数法

将已知颗粒(如霉菌孢子或红细胞)浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按一定比例均匀混合，在显微镜视野中数出各自的数目，即可得未知菌液的细胞浓度。这种计数方法比较粗放。并且需要配制已知颗粒浓度的悬液做标准。

2.4 液体稀释法

对未知菌样做连续十倍系列稀释，根据估计数，从最适宜的三个连续的10倍稀释液中各取5 mL试样，接种1 mL到3组共15只装培养液的试管中，经培养后记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查最大或然数表MPN(Most Probable Number)得出菌样的含菌数，根据样品稀释倍数计算出活菌含量。该法常用于食品中微生物的检测，例如饮用水和牛奶的微生物限量检查。

2.5 平板菌落计数法

这是一种最常用的活菌计数法。将待测菌液进行梯度稀释，取一定体积的稀释菌液与合适的固体培养基在凝固前均匀混合，或将菌液涂布于已凝固的固体培养基平板上。保温培养后，用平板上出现的菌落数乘以菌液稀释度，即可算出原菌液的含菌数。一般以直径9 cm的平板上出现50~500个菌落为宜。但方法比较麻烦，操作者需有熟练的技术。平板菌落计数法不仅可以得出菌液中活菌的含菌数，而且同时将菌液中的细菌进行了一次分离培养，获得了单克隆。

2.6 试剂纸

在平板计数法的基础上，发展了小型商品化产品以供快速计数用。形式有小型厚滤纸片，琼脂片等。在滤纸和琼脂片中吸有合适的培养基，其中加入活性指示剂2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑(TTC，无色)待蘸取测试菌液后置密封包装袋中培养。短期培养后在滤纸上出现一定密度的玫瑰色微小菌落与标准纸色板上图谱比较即可估算出样品的含菌量。试剂纸法计数快捷准确，相比而言避免了平板计数法的人为操作误差。

2.7 膜过滤法

用特殊的滤膜过滤一定体积的含菌样品，经丫叮橙染色，在紫外显微镜下观察细胞的荧光，活细胞会发橙色荧光，而死细胞则发绿色荧光。

3. 间接测定法

微生物的生长伴随着一系列生理指标发生变化，例如酸碱度，发酵液中的含氮量，含糖量，产气量等，与生长量相平行的生理指标很多，它们可作为生长测定的相对值。因此可利用生理指标等间接参数来测定生物量。

3.1 测定含氮量

大多数细菌的含氮量为干重的12.5%，酵母为7.5%，霉菌为6.0%。根据含氮量×6.25，即可测定粗蛋白的含量。含氮量的测定方法有很多，如用硫酸，过氯酸，碘酸，磷酸等消化法和Dumas测N2气法。Dumas测N2气法是将样品与CuO混合，在CO2气流中加热后产生氮气，收集在呼吸计中，用KOH吸去CO2后即可测出N2的量。

3.2 测定含碳量

将少量(干重0.2~2.0 mg)生物材料混入1 mL水或无机缓冲液中，用2 mL 2%的K2Cr2O7溶液在100 ℃下加热30分钟后冷却。加水稀释至5 mL，在580 nm的波长下读取吸光光度值，即可推算出生长量。需用试剂做空白对照，用标准样品做标准曲线。

3.3还原糖测定法

还原糖通常是指单糖或寡糖，可以被微生物直接利用，通过还原糖的测定可间接反映微生物的生长状况，常用于大规模工业发酵生产上微生物生长的常规监测。方法是，离心发酵液，取上清液，加入斐林试剂，沸水浴煮沸3分钟，取出加少许盐酸酸化，加入Na2S2O3临近终点时加入淀粉溶液，继续加Na2S2O3至终点，查表读出还原糖的含量。

3.4 氨基氮的测定

离心发酵液，取上清液，加入甲基红和盐酸作指示剂，加入0.02 mol/L的NaOH调色至颜色刚刚褪去，加入底物18%的中性甲醛，反应数刻，加入0.02 mol/L的使之变色，根据NaOH的.用量折算出氨基氮的含量。根据培养液中氨基氮的含量，可间接反映微生物的生长状况。

3.5 其他生理物质的测定

P，DNA，RNA，ATP，NAM(乙酰胞壁酸)等含量以及产酸，产气，产CO2(用标记葡萄糖做基质)，耗氧，黏度，产热等指标，都可用于生长量的测定。也可以根据反应前后的基质浓度变化，最终产气量，微生物活性三方面的测定反映微生物的生长。如在BMP-2的发酵生产上，随时监测溶氧量的变化和酸碱度的变化，判断细菌的长势。

4. 商业化快速微生物检测法

微生物的检测，其发展方向是快速，准确，简便，自动化，当前很多生物制品公司利用传统微生物检测原理，结合不同的检测方法，设计了形式各异的微生物检测仪器设备，正逐步广泛应用于医学微生物检测和科学研究领域。例如：

4.1 试剂盒，培养基等手段

抗干扰培养基和微生物数量快速检测技术结合解决了传统微生物检测手段不能解决的难题，为建立一套完整的抗干扰微生物检测系统奠定了坚实的基础。如：抗干扰微生物培养基，新型生化鉴定管，微生物计数卡，环境质量检测试剂盒等，可方便的用于多项检测。

4.2 借助新型先进仪器

BACTOMETER全自动各类总菌数及快速细菌检测系统可以数小时内获得监测结果，样本颜色及光学特征都不影响读数，对酵母和霉菌检测同样高度敏感原理是利用电阻抗法(Impedance Technology)将待测样本与培养基置于反应试剂盒内，底部有一对不锈钢电极，测定因微生物生长而产生阻抗改变。如微生物生长时可将培养基中的大分子营养物经代谢转变为活跃小分子，电阻抗法可测试这种微弱变化，从而比传统平板法更快速监测微生物的存在及数量。测定项目包括总生菌数，酵母菌，大肠杆菌群，霉菌，乳酸菌，嗜热菌，革兰氏阴性菌，金黄色葡萄球菌等。

微生物OD值是反映菌体生长状态的一个指标，OD是Optical Density(光密度)的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度。通常400～700 nm 都是微生物测定的范围，需要紫外分光光度计测最大吸收波长。用得最多的是：505 nm测菌丝菌体、560 nm测酵母、600 nm测细菌。用测OD方法画微生物生长曲线时，同一株菌的起始培养浓度可以准备多管(根据检测点的需要，如需检测10个点，就准备10管)，然后每个点取一管出来测OD值就行了。

一般测菌体密度的OD的波长范围是580 nm-660 nm，如枯草芽孢杆菌用600 nm，已经属于可见光区(200 nm～400 nm为紫外光区，400 nm～800 nm为可见光区)。空白如用水做，需要离心洗涤菌体;空白如用不接种的培养基做就不需要洗涤，但是不接种的培养基要和接种的同时培养以求条件一致，最后注意一般OD值在控制在0.1~0.4最好，在这个区内的值就可靠，如果OD大于1.0，一般要稀释后再测，因为OD太大，分光光度计的灵敏度就会显著降低。

一般都测吸光值，而且最好是整个实验过程中，保持发酵液或菌体的稀释倍数一致，吸光值与稀释倍数不一定成正比，可保证整个实验点有可比性。且取值的时候要连续读数，重复3次的数最好。

另，用分光光度计测微生物的OD值为什么要把波长设为600 nm

这个波长其实只是针对浊度，而分光光度计在600 nm处对浊度的反应比较灵敏。测吸收峰的实际意义并不大，比如LB摇瓶培养过夜的大肠杆菌，其实在400多纳米处的吸收最大，但那很可能是培养液的吸收峰。

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第九章

在自然界，生物不断地从环境中吸收它们生长发育所必需的C、H、O、N、S、P等各种营养元素。但是，这些营养元素在自然界的总量是有限的，而生命的延续是无限的，只有这些元素的循环使用，生物界不断向前发展。促进这些物质循环的作用有物理作用、化学作用和生物作用，其中生物是起主导作用的，而微生物是自然界物质循环的主要推动者，在自然界物质循环中起着非常重要的作用。本文主要介绍了微生物在氮素循环中的作用。

关键词：固氮氨化硝化同化反硝化

2微生物在氮素循环中的作用

氮是核酸和蛋白质的主要成分，是构成生物体的必需元素。虽然占大气体积硝酸盐等无机氮化物，在自然界为数不多，只有将大气中的N氨化作用、硝化作用、反硝化作用以及同化作用，这其中的每一种作用都离不开微生物的参与。

2.1固氮作用

分子态氮被还原成氨或其它氮化物的过程称为固氮作用。自然界氮的固定有两种方式，一是非生物固氮，即通过雷电、火山爆发和电离辐射等固氮以及人工合成氨，非生物固氮形成的氮化物在数量上远不能满足自然界生物生长的需要；二是

生物固氮，即通过微生物的作用固氮，自然界生物生长所需要的氮大部分通过这种作用提供。生物固氮不仅经济，而且不破坏环境，在N放线菌和蓝细菌(徐孝华,1991)。

2.2氨化作用

微生物分解含氮有机物产生氨的过程称为氨化作用。氨化作用在农业生产中十分重要，施入土壤中的各种动植物残体和有机肥，包括绿肥、堆肥和厩肥都含有丰富的含氮有机物。这些有机物须通过各类微生物的作用，将其氨化后才能被植物吸收和利用。水中的氨化细菌有助于水体中氮的循环和水的清洁，湖的底泥中氨化细菌相当活跃(Genovese,1994)。

2.3硝化作用

微生物将氨氧化成硝酸盐的过程称为硝化作用。硝化作用是自然界氮素循环中不可缺少的一环。硝化作用分两个阶段进行，每个阶段都离不开微生物的作用。第一阶段是氨在亚硝化细菌的作用下被氧化为亚硝酸盐。第二阶段是亚硝酸盐在硝化细菌的作用下被氧化为硝酸盐。土壤中固氮细菌的数量多于硝化细菌(金钧然,1991)。

2.4同化作用

铵盐和硝酸盐是植物和微生物良好的无机氮类营养物质，它们可被植物和微生物吸收利用，合成氨基酸、蛋白质、核酸和其它含氮有机物。湖泊中具有同化作用的细菌有助于淡水鱼对蛋白质的利用(Shivokene,1996)。

2.5反硝化作用

微生物还原硝酸盐，释放出分子态氮和/或N2O的过程称为反硝化作用或脱氮作

用。反硝化作用是造成土壤氮素损失的重要原因之一。反硝化作用一般只在厌氧条件下进行，在农业生产上常采用中耕松土的办法抑制反硝化作用。从整个氮素循环来说，反硝化作用是有利的。水体中的'反硝化细菌有助于碳的循环(宋金明,2000)。湖水沉积物中含有大量的反硝化细菌，如果没有反硝化作用，自然界的氮素循环就会被中断，硝酸盐将会在水体中大量蓄积，对人类的健康和水生生物的生存就会造成极大的威胁(Peptea,1998)。

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名词解释

酶的活性中心是指在酶蛋白分子中与底物结合，并起催化作用的小部分氨基酸微区。

中间产物学说酶与底物先络合成一个络合物，此中间产物被看作为稳定的过度态物质，然后络合物再进一步分解，成为产物和游离态酶。

生长因子一类调节微生物正常代谢所必需、但不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物，只需很少量。

培养基人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的营养基质。选择培养基根据某微生物的特殊营养要求或其对化学、物理因素有抗性而设计的培养基，具有使混合样中的劣势菌变成优势菌的功能。

鉴别培养基在培养基中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只需肉眼就能方便地从近似菌落中找出目的菌落的培养基。

基团转位一类既需要特异性载体蛋白的参与，又需要消耗能量的一种物质运输方式，其特点是溶质在运送前后分子结构发生变化。

发酵是指在无外在电子受体时，底物脱氢后所产生的还原力[H]不经呼吸链传递而直接交给某一内源性中间产物接受，以实现底物水平磷酸化产能的一类生物氧化反应。好氧呼吸在是有氧的情况下，微生物将底物彻底氧化，脱下的氢完整的呼吸链（电子传递体系）传给分子氧并生成水和产生大量ATP的过程。

种群（population）指有相似特性和生活在特定空间的同一生物种的所有个体的集合体.种群是生物群落的基本组分。

群落（community），指一定时间内生态系统是在一定时间和空间范围内由生物与它们的生境通过能量流动和物质循环所组成的一个自然体。居住在一定空间范围内的生物种群的集合。

生态平衡生态系统在一定的时间和空间内，保持相对稳定的状态，并能对外来干扰进行自我调节。

土壤自净土壤对进入其中的一定负荷的有机物或有机污染物具有吸附和生物降解能力，通过各种物理、生化过程自动土壤自净是有一定限度的，即自净容量。分解污染物使土壤恢复到原有水平的净化过程，称土壤自净。

土壤生物修复是利用土壤中天然的微生物资源或认为投加目的菌株，甚至用构建的特异降解功能菌投加到污染土壤中，将滞留的污染物快速降解和转化，使土壤恢复其天然功能。

水体自净河流（水体）接纳了一定量的有机污染物后，在物理的、化学的和水生物（微生物、动物和植物）等因素的综合作用后得到净化，水质恢复到污染前的水平和状态，叫作水体自净。

分批培养是将一定量的微生物接种在一个封闭的、盛有一定量液体培养基的容器内，保持一定的温度、pH和溶解氧量，微生物在其中生长繁殖，结果出现微生物数量又少变多，达到高峰后又由多变少，甚至死亡的变化规律。

光复活现象经紫外线照射的微生物，随即暴露于可见光下，有一部分受损伤的细胞可恢复其活力。

灭菌采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。

消毒采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌,从而被消毒的物体基本无害的措施灭菌.水活度 :在相同的温度和压力下，某溶液的蒸汽压（P）和纯水的蒸汽压（P0）之比，即aw = P／P0

驯化在工业废水生物处理过程中，用含有某些污染物的工业废水筛选、培养来自处理其他废水的菌种，使它们适应该种工业废水并有效降解其中污染物能力的方法叫驯化。

半保留复制首先DNA双螺旋分子在解旋酶的作用下，两条多核苷酸链之间的氢键断裂，分离成两条单链，然后各自以原有的多核苷酸链为模板，根据碱基配对原则合成新的互补链，这样形成的两个子代DNA分子与原来的DNA分子完全相同，故称之为复制。又因子代DNA分子的双链一条来自亲代，另一条是新合成的，故称为半保留复制。

DNA变性当天然双链DNA分子在热、酸或碱等因素作用下，氢键被破坏，成为不规则的卷曲单链，称为DNA变性。

复性变性DNA溶液经适当处理后重新形成天然DNA的过程叫复性。

基因突变：点突变，由于DNA（RNA病毒和噬菌体的RNA）链上的一对或少数几对碱基被另一个或少数几个碱基对取代发生改变的突变类型。

诱变：指通过认为的方法，利用物理、化学或生物因素显著提高基因自发突变频率的手段。

移码突变：由于DNA序列中一个或少数几个核苷酸发生增添或缺失，从而使该处后面的全部遗传密码的阅读框架发生改变，并进一步引起转录和转译错误的一类突变。基因重组：两个不同性状的个体细胞的DNA融合，使基因重新组合，从而发生遗传变异，产生新品种的过程。

转化：受体菌直接吸收供体菌的DNA片段而获得后者部分遗传性状的现象，称为转化。

转导：通过缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中，通过交换与整合，后者获得前者部分遗传性状的现象。

普遍转导：通过完全缺陷噬菌体对供体菌基因组上的任何小片段DNA进行误包，而将其遗传性状传递给受体菌的现象。

局限转导：通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中，并与后者的基因组整合，形成转导子的现象。

接合：通过供体菌和受体菌完整细胞间的直接接触，前者的部分DNA进入后者细胞内，并与其核染色体发生交换、整合，从而使后者获得供体菌的遗传性状的现象。降解性质粒：携带有降解某些复杂有机物的酶的基因，含有这类质粒的细菌，特别是假单胞菌，能降解复杂的有机物，尤其是一些有毒的化合物，如芳香族化合物、农药、樟脑、辛烷等，该类质粒一般按其降解的底物来命名，如樟脑质粒（CAM）、辛烷质粒（OCT）等。

质粒育种：将两种多种微生物通过细胞接合或细胞融合技术，使供体菌的质粒转移到受体菌体内，使受体菌保留自身的功能质粒，同时获得供体菌的功能质粒，从而获得了具有几种功能质粒的新品种。

基因工程：是利用DNA重组技术，在体外通过人工剪切和拼接等方法，对生物的基因进行改造或重新组合，然后导入受体细胞内，使重组的基因在受体细胞中扩增和表达，从而产生出人类所需要的基因产物。

限制性内切酶：指能识别双链DNA分子的特定序列，并在其识别位点或其附近切割DNA的一类内切酶。

假菌丝当酵母菌进行一连串的芽殖后，如果长大的子细胞与母细胞不立即分离，其间仅以极狭小的面积相连，这种藕节状的细胞串成为假菌丝。

灭菌：采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。

消毒：采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌，而对被消毒的物体基本无害的措施灭菌。

固定化酶，通过物理吸附法或化学键合法将水溶性酶和固态的不溶性载体相结合，使酶变成不溶于水但仍保留催化活性的衍生物。

固定化微生物，用制备固定化酶的方法将微生物固定在载体上，即成固定化微生物。

半保留复制：首先DNA双螺旋分子在解旋酶的作用下，两条多核苷酸链之间的氢键断裂，分离成两条单链，然后各自以原有的多核苷酸链为模板，根据碱基配对原则合成新的互补链，这样形成的两个子代DNA分子与原来的DNA分子完全相同，故称之为复制。又因子代DNA分子的双链一条来自亲代，另一条是新合成的，故称为半保留复制。

当天然双链DNA分子在热、酸或碱等因素作用下，氢键被破坏，成为不规则的卷曲单链，称为DNA变性。

变性DNA溶液经适当处理后重新形成天然DNA的过程叫复性。

基因突变：点突变，由于DNA（RNA病毒和噬菌体的RNA）链上的一对或少数几对碱基被另一个或少数几个碱基对取代发生改变的突变类型。

诱变：指通过认为的方法，利用物理、化学或生物因素显著提高基因自发突变频率的手段。

好氧活性污泥是由多种多样的好氧微生物和兼性厌氧微生物（兼有少量厌氧微生物）与污（废）水中的有机和无机固体物混凝交织在一起所形成的絮状体。菌胶团：所有具有荚膜或粘液或明胶质的絮凝性细菌互相絮凝聚集成的细菌团块。

好氧生物膜是由多种多样的好氧微生物和兼性厌氧微生物粘附在生物滤池滤料上或粘附在生物转盘盘片上的一层带粘性、薄膜状的微生物混合群体。

厌氧活性污泥：由兼性厌氧菌和专性厌氧菌与废水中的有机杂质交织在一起形成的颗粒污泥。

捷径反硝化，即通过限制充氧量（0.5~1.0mg/L)和缩短曝气时间等条件，抑制硝化细菌生长，促使亚硝化细菌生长，迅速将氨氧化为HNO2后，随即利用有机物将HNO2还原为N2的过程。

某些微生物在好氧时能大量吸收磷酸盐合成自身核酸和ATP，并且能逆浓度过量吸磷合成贮能的多磷酸盐颗粒（异染粒和PHB）在体内，供其内源呼吸用。这些细菌称为聚磷菌。

堆肥化使依靠自然界广泛分布的细菌、放线菌和真菌等微生物，有控制地促进可生物降解的有机物向稳定的腐殖质转化的过程。

生物修复是利用天然存在的或特别培养的微生物在可调控环境条件下将环境中的有毒污染物转化为无害物质的处理技术。

生物地球化学循环：指生物圈中的各种化学元素，经生物化学作用在生物圈中的转化和运动。

有机氮化物在氨化微生物的脱氨基作用下产生氨，称为氨化作用。

在有氧条件下，氨经亚硝化细菌和硝化细菌的作用转化成硝酸的作用，称为硝化作用。

在厌氧条件下，反硝化细菌将将硝酸盐还原成亚硝酸盐和气态氮化物（N2和N2O）的作用，称为反硝化作用。

分子氮通过固氮微生物固氮酶系的催化形成氨，进而合成为有机氮化物的作用，称为固氮作用。

硫化作用：在有氧条件下，通过硫细菌的作用将硫化氢转化成元素硫，再进而氧化成硫酸的过程。

在厌氧条件下，某些微生物利用硫酸盐作为末端电子受体还原成不被同化的H2S的作用，称为反硫化作用。这些微生物为硫酸盐还原菌，菌落在固体培养基上，由一个细菌繁殖起来的，由无数细菌组成的、肉眼可见的具有一定形态的细菌集团。

由细胞质膜上的鞭毛基粒长出穿过细胞壁伸向菌体外的一条纤细呈波浪弯曲的丝状物叫鞭毛，具有运动功能。

某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成一个圆形或椭圆形、壁厚、含水量极低、抗逆性极强的休眠体，称为芽孢。

荚膜：某些细菌在其细胞壁表面分泌一层粘性物质，把细胞壁完全封住，使细菌和外界环境有明显的边缘，这层粘性物质叫荚膜。

质粒：游离于原核生物核基因组以外，具有独立复制能力的细胞质遗传因子。酶是生物体内合成的一种具有催化性能的蛋白质，它是生物催化剂。

抗生素：是一类由微生物或其他生物生命活动过程中合成的次生代谢产物或人工衍生物，它们在很低的浓度时就能抑制或干扰它种生物的生命活动，因而可用作优良的化学治疗剂。

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(八钟虫、沟

钟虫、褶钟虫、瓶累枝虫、微盘盖虫、独缩虫)这些缘毛目的种类都固定在絮状物上，并随窗之而翻动，其中还夹杂一些爬行的栖纤虫、游仆虫、尖毛虫、卑气管叶虫等，这说明优质而成熟的活性污泥。

(2)小口钟虫在生活污水和工业废水处理很好时往往就是优势菌种。

(3)如果大量鞭毛虫出现，而着生的缘毛目很少时，表明净化作用较差。

(4)大量的自由游泳的纤毛虫出现，指示净化作用不太好，出水浊度上升。

(累枝虫、盖虫、轮虫、寡毛类时，则水质澄清良好，

出水清澈透明，酚类去除率在90%以上。

(6)根足虫的大量出现，往往是污泥中毒的表现。

(解絮的征兆。

(8)而在印染废水中，累枝虫则作为污泥正常或改善的指示生物。

(9)在石油废水处理中钟虫出现是理想的效果。

(10)过量的轮虫出现，则是污泥要膨胀的预兆。

另在一些对原生动物不宜生长的污泥中，主要看菌胶团的大小用数量来判断处理效果。二、

　　下面是几种生物相对活性污泥的指示情况：

盾纤虫、盖纤虫、累枝虫、聚缩虫、内管虫、独缩虫等吸附性原生动物。如果此类微生物占总数的80%以上，个体在1000个/mL以上的话，应该判断为具有高净化效率的活性污泥。

，可以判断为絮凝体细碎。严重恶化时原生动物和后生动物消失。

多核变形虫、扇形变形虫等肉足类。可判断为絮体变小出水混浊，SS升高，而这类微生物急增时必须调整工艺状态，减少回流污泥量和通气量，则可以印制污泥解体。

5、在活性污泥膨胀时出现的微生物主要有：浮游球衣藻和霉菌。丝壮菌是造成污泥膨胀的诱导生物，丝壮菌大量增殖是，则吸附型的原生动物急剧减少，污泥性能恶化，形成所谓的漂泥现象。一旦出现丝壮菌增殖的趋势，4-7天后SVI急剧上升甚至会超过200。

狭甲虫等生物。判断为有机物较少，应增大曝气量。溶解氧不足时出现的微生物主要有；扭头虫、丝壮菌等，此时污泥发黑并放出腐臭味，应增大曝气量。曝气过量时出现的微生物主要有：肉足类及轮虫类，包括阿米巴虫，高负荷和毒物流入时出现的微生物主要有；盾纤虫和钟虫的`锐减是负荷过高和毒物流入的征兆，大多数微生物灭绝时活性污泥已被破坏，必须进行恢复。

漫游虫、豆型虫、波豆虫等，而细菌则以游离细菌为主，此时表明水中的有机物还很多，处理效果很差。如果原水水质良好，突然出现固定纤毛虫减少，游泳纤毛虫增加的现象，预示水质要变差，逐渐出现游动纤毛虫，水质将向好的方向发展，直致变为固定纤毛虫为主，则水质变得良好。

8、镜检中发现积硫较多的丝硫细菌，游动细菌时，往往是曝气时间不足，空气量不够，流量过大，或水温较低，处理效果较差。

9、在大量钟虫存在的情况下盾纤虫数量多而且越来越活跃，这读曝气池工作不利。要注意，可能悟泥会变得松散，如果钟虫量递减，盾纤虫量递增，则替伏着污泥膨胀的可能。当发现等枝虫成堆出现，并不活跃，肉眼能见污泥中有小白点，同时发现贝氏硫菌和丝硫菌积硫点十分明显，则表明曝气池溶解氧低，一般在0.5mg/L左右。

如果发现单个钟虫活跃，其体内的食物泡都能清晰地观察到时，说明污水处理的程度高，溶解氧充足。二沉池的出水中有许多水蚤，其体内的血红素低，说明溶解氧高，水蚤的颜色很红时，则说明出水几乎无溶解氧。

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关于实验微生物接种技术

一、目的：

学习微生物工作的基本接种方法，建立纯培养技术中的“无菌”概念，掌握无菌操作技术。

　　二、原理：

所谓接种就是将一定量的纯种微生物在无菌操作条件下转移到另一已灭菌，并适宜于该菌生长繁殖所需的培养基上的过程。本实验要求严格进行无菌操作，一般是在无菌操作台或在实验室内火焰旁进行。根据不同的实验目的和培养方式，可以采用不同的接种工具和接种方法。

　　三、实验材料：

斜面培养基、液体培养基、平板培养基、记号笔、酒精灯、接种针、消毒酒精、涂布棒等。

　　四、操作步骤

（一）无菌操作

菌种分离或移接工作应在无菌环境中进行，接种室、接种箱或超净工作台是常用的接种环境。用前先清洁好卫生，再进行消毒处理。可用紫外线灯和甲醛熏蒸的双重作用，或用3%来苏尔及其他表面消毒进行喷雾。

操作者的手应先用肥皂洗净，再用酒精棉球消毒；整个操作过程都要靠近酒精灯火焰；接种工具在用前和用后必须在灯焰上灭菌；棉塞不得乱放，操作中只能夹在手上；不能有跑、跳等力度大的'动作，以免引起空气大振动而增加染菌机会。

（二）接种方法

（1）斜面接种：

从已长好微生物的菌种管移接到另一斜面管的方法。此法用于好气性微生物的接种。

左手持菌种管和斜面管，使斜面向上，并尽量放平。用右手先将棉塞拧转松动，再拿接种环，用右手的小指、无名指和手掌拨下棉塞并夹紧，同时将管口在火焰上燃烧一圈，接种环灼烧灭菌后插入管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底部，沿斜面划曲线或直线。

（2）液体接种：

由斜面菌接种到液体培养基（如试管或三角瓶等）中的方法。

操作与上法基本一致，只是在将接种环送入液体培养基中时使环在液体与管壁接触的地方轻轻磨擦，使菌体分散，然后塞上棉塞，再轻轻摇动均匀，即可培养。如果菌种是培养在液体培养基中时，一般用移液管或滴管接种。

（3）穿刺接种：

用接种针挑取菌种后，插入深层固体培养基内，（不要刺到底部），再沿原路拔出，此法用于厌气性细菌接种、检查细菌的运动能力。

（4）平板接种：

将菌种接至培养皿的方法，平板接种的目的是观察菌落形态、分离纯化菌种，活菌计数以及在平板上进行各种试验时采用的一种接种方法，可分为下面几种：

1)斜面接平板

a.划线法：见平板划线分离法。

b.点种法：一般用于观察霉菌和酵母细胞，轻轻点在平板的表面（根霉点一点，曲霉、酵母可点即可。

保存之用。

五、思考题

1．何谓无菌操作？接种前应作哪些准备工作？

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在大三上学期我有机会学习了《环境微生物学》，在此期间我们在老师的带领下学习了微生物学的前七章的内容，在学习的过程中我逐渐详细的学到什么是微生物，微生物是怎样存在我们周围的，微生物是怎么进行新陈代谢作用的，以及微生物跟我们的生活和环境的紧密联系等，虽然他们一直都环绕在我们的身边。认识到哪些微生物对我们的生活有利，哪些微生物是对我们有害的，哪些微生物我们可以加以利用，哪些我们要进行预防和自我保护、学到了怎样去分更好地养成良好的生活习惯，给自己和周围的人打造一个健康、安全的生活环境。[幼儿教师教育网 Www.Yjs21.CoM]

但是在学习的过程中我也遇到过问题，比如说，环境中微生物之间有没有像植物之间的竞争关系，下互利共生关系等，这个我也没有想明白和看到过哪有资料来清楚的讲解。还有在之前我也一直想到过这样一个问题的，地球上为什么会先形成了微生物，那是必然吗?我当时想通过学这本课程的找到答案，但学完后也没有实质的进展。感觉自己学习微生物学时没有很大的主动性，遇到了问题也只是抱着遇到了机会就会解决的态度，没有主动的去查找资料，因而到了学完这门课当初那些想到的没有解决的问题还是在那里。这点我想在以后的学习中要学着去主动，才能更好地学到更多的知识。

老师给我们上这门课的方式还是很好的，刚开始那种在每节课的开始能抽些同学来温习下上次课所学的东西，我觉得这种方法是很好的，能很好地帮助我们巩固学到的知识。但老师不应该就因为一些同学的话就放弃了这种方法的。同时我们学完这门课程也没有用到足够的课时，虽然是由于特殊的原因，但我们还是希望我们该学的东西还是能有足够的时间保证来完成的。我认为微生物学是一门很有趣的学科的，老师在教我们时候没有能很有重点的教给我们当前微生在实际中的重要应用，而是把主要经历放在了完成教学任务上了，这与最后让我们分成小组来完成一片类似于论文的作业是有点不符的，我们在完成作业刚开始根本就看不懂这个题目该往哪个方向来写，没有实际的应用接触和了解，后来花了不少的功夫才找到了一点眉目的。

总的来说这次微生物学的学习虽然显的有些短暂，但是我还是从中真正学到了东西的，也发现了自己的一些缺点，我觉得这也是一个很大的收获。

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关于微生物需要的条件

1.充足的营养：必须有充足的营养物质才能为细菌的新陈代谢及生长繁殖提供必需的原料和足够的能量。

；嗜温菌，20℃～40℃；，在高至56℃～60℃生长最好。病原菌均为嗜温菌，最适温度为人体的体温，即37℃，故实验室一般采用37℃培养细菌

有些嗜温菌低温下也可生长繁殖，如5℃冰箱内，金黄色葡萄球菌缓慢生长释放毒素，故食用过夜冰箱冷存食物，可致食物中毒。

。人类血液、组织液PH为、乳本乡

杆菌（pH。细菌代谢过程中分解糖产酸，PH下降，影响细菌生长，所以培养基中应加入缓冲剂，保持PH稳定。

否则生长很差甚至不能生长。

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2012微生物生理学复习题

（仅供复习时参考，未列出者仍属考试范围，教材及上课ppt均需顾及）

1.写出三个以上你所熟知的微生物生理学奠基人（中英文均可，英文可只写Family

name）及各自主要贡献（一句话）。

2.微生物细胞的显微和亚显微结构，按照在细胞中的部位与功能，可分为哪三部分？

各自包括哪些主要结构？

3.比较G、G真细菌的细胞壁结构、组成。（G+：肽聚糖、磷壁酸、壁醛酸、表面蛋

白；G-：脂多糖、脂蛋白、磷脂、蛋白质）

4.从嗜热菌的细胞壁和细胞膜的结构特点来阐释其耐热的机理。

5.不同真菌细胞壁中多糖组成的一般规律。

6.微生物细胞膜的生理功能?

7.真细菌细胞膜的主要脂类有：

8.酵母细胞中有关甾醇的情况。

9.细菌鞭毛和真核微生物鞭毛的组成、特点及运动方式。

10.哪些细菌具有发达的内膜系统？为什么？

11.细胞型微生物需要的营养物可分为哪五类？

12.依据微生物获取能源、碳源、氢或电子供体的方式，将微生物分为哪四种营养方式？

13.化能无机营养菌的四大类群为：

14.微生物对小分子营养物质的吸收主要通过哪四种方式，各有何特点？

15.基团转运的典型例子有哪两种，大概情况如何？

16.到目前为止，大肠杆菌中发现了两种蛋白质转运系统，分别是：

17.影响营养物质进入细胞的因素有哪些？

18.参与促进扩散的膜运输蛋白一般可分为哪两种？

19.什么是有氧呼吸、无氧呼吸、发酵？

20.ATP几乎是生物组织和细胞能够直接利用的唯一能源。除了ATP外，一些特定的高

能化合物如：PEP、1,3-2P-GA、酰基磷酸(Ac-P)、酰基硫代酯(ScCoA)等也可以作为能量载体。

21.化能异养微生物的有氧分解代谢可划分为哪三个阶段，具体内容如何？ +-

22.合成代谢与分解代谢的关系

23.简述淀粉酶、纤维素酶、蛋白酶及果胶酶等胞外酶的组成、产生菌的种类及在有机

物质转化和农业生产中的作用。

24.分解脂肪的微生物都具有脂肪酶。在脂肪酶作用下，脂肪水解为甘油和脂肪酸。甘

油经糖酵解和三羧酸循环作用可被迅速地降解。脂肪酸经过-氧化形成乙酰CoA。在有氧的条件下，产生的乙酰CoA进入三羧酸循环后，可被彻底氧化。

25.EMP、HMP、ED、P(H)K途径的特征酶、功能分别是什么？

26.什么是底物水平磷酸化，什么是氧化磷酸化？

27.论述利用酵母菌对葡萄糖进行一型、二型、三型发酵的条件和各种类型发酵的内容

及特点，包括产能情况。

28.细菌的酒精发酵由什么途径进行？同型: EMP或ED;异型: HMP,HP

29.细菌型同型乙醇发酵的优缺点

30.青贮饲料，腌泡菜和渍酸菜过程中的乳酸发酵的情况

31.什么是同型乳酸发酵和异型乳酸发酵？分别由什么途径进行？

32.TCA循环的关键酶是什么？TCA循环的生理功能是什么？厌氧条件下如何合成TCA

循环中的中间产物？

33.li分解一分子葡萄糖为CO2和H2O产生多少ATP？如何产生的？

34.和线粒体的呼吸链相比，细菌呼吸链有何特征？厌氧微生物有无呼吸链？

35.化能无机营养菌有哪几类？各自的能源是什么？

36.氢细菌中含有哪两种氢化酶？各有何作用？

37.什么是放氧性光合作用、非放氧性光合作用？光能营养型微生物有哪些（3类）？

38.光能微生物进行能量转换可通过环式光合磷酸化合和非环式光合磷酸化，其中绿硫

细菌和紫硫细菌采用，蓝细菌采用。

39.化能无机营养菌生长缓慢的原因是什么？（生长底物简单，能量产生少，能量消耗

多（能量大量消耗在从简单底物合成复杂的细胞组分以及逆呼吸链产生合成所需的还原力））

40.试述嗜盐菌紫膜产生ATP的机理。（视黄醛，有光时为反式结构，处于低能量状态，容易吸收质子；黑暗时为反式和顺式结构的混合物（1：1），顺式结构为高能量状态，容易释放质子。光照条件下，反式结构从膜内吸收质子，然后转变为顺式结构，顺式结构上的质子释放到膜外，然后又转变为反式结构，再吸收质子，循环进行。产

生质子动力, 质子动力推动ATP 酶合成ATP）

41.酵母菌氧化一分子硬脂酸为CO2和H2O能产生多少ATP？如何产生的？

42.葡萄糖进入微生物细胞后在有氧、无氧条件下如何分解转化?产物是什么?

43.微生物的合成代谢必须具备哪三要素？

44.在自养微生物中，固定CO2主要有哪三条途径？

45.甲烷氧化菌氧化甲烷的一系列产物及所涉及到的酶的情况。

46.二碳化合物的同化途径，归纳起来主要为乙醛酸途径和甘油酸循环两个代谢途径。

47.糖异生及过程

48.细菌细胞壁肽聚糖合成是微生物特有的合成反应，简述其过程，并通过肽聚糖合成过程说明青霉素等抗生素抑制革兰氏阳性细菌生长的机理。

49.微生物固氮体系有哪些？各有哪些微生物？

50.固氮酶有哪些性质？

51.氨基酸的生物合成主要有哪三种方式？

52.简述微生物合成代谢的意义、类型、原料、基本路线及与分解代谢的关系。

53.次级代谢的概念，次级代谢及其产物的特点。

54.次级代谢产物根据其作用可分为哪些类型？

55.初级代谢产物大概经过哪三个步骤逐步合成次级代谢产物？

56.微生物的代谢调节环节有哪些？

57.什么是分支代谢途径中的顺序反馈抑制，协同反馈抑制，累积反馈抑制，增效反馈

抑制？可用图示解释。

58.在诱导酶的合成时，什么是协同诱导，顺序诱导？

59.如何解释大肠杆菌在乳糖和葡萄糖的混合培养基中出现的二次生长现象？

60.巴斯德效应及其产生机制。

61.次级代谢的调节可通过哪些方式来实现？

62.如何将有关代谢调控的知识应用于发酵工业，着重从代谢育种和生长条件的控制两

方面进行阐述。

63.大肠杆菌在不同生长速度下如何保证其遗传物质染色体的完整性？

64.细菌生长曲线的特征及在发酵工业中如何应用？

65.细菌生长代时的计算

66.霉菌菌落在平板上进行分化时，可分为哪三个不同的形态区域？菌丝径向生长时其

特征如何？

67.丝状真菌的顶端生长受哪些可能的机制影响？

68.什么是钙调素，如何受到钙离子浓度的影响而起调节作用？

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69.进行微生物培养的三种常见培养方式

70.获得同步生长细胞的方法有：

71.进行连续培养的装置有哪些？各有何特点？

72.有哪些环境因子可能对微生物的生长产生影响？

73.微生物可通过哪两种主要的方式来适应环境？

74.微生物抗药性的获得途径及通过哪些方式来产生抗药性？

75.微生物免除高浓度重金属离子毒害的机制有哪些？

76.微生物的分化可分为哪三种类型？

77.芽孢的生态学及生理学特点及芽孢的耐热机制。

78.黏细菌的生活周期可分为哪四个阶段？

79.什么是生物膜？形成生物膜的细菌有何特点？

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微生物检测所需仪器：1、天平。

一、菌落总数：仪器和设备1mL。8酒精灯。9恒温培养箱：36℃±1℃。10放大镜。

二、粪大肠菌群：仪器和设备1mL。13灭菌平皿：直径90mm。

三、绿脓杆菌仪器和设备1mL。6显微镜。7载玻片。8接种针，接种环。9电磁炉。10高压灭菌器。

四、金黄色葡萄球菌仪器和设备10mL。5灭菌试管：15×150mm。6载玻片。7酒精灯。

五、霉菌和酵母菌仪器和设备10mL。8量筒，200mL。9酒精灯。10高压灭菌器。

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一“、以实际应用为导向”对教学内容进行取舍

传统教学内容往往与企事业的实际需求有所偏差，为了让学生在今后的工作实践中能实际应用所学知识技能，我们首先对相关行业的企事业单位进行调研，并根据调研结果对教学内容进行了相关调整，将教学内容分为基础部分和专业部分。基础部分为必须讲授的微生物基础知识及实验技能训练，它们包括：微生物在自然界中的分布；微生物的分类、形态、构造及功能；微生物的营养和培养基；微生物代谢、控制和培养；显微技术、微生物大小测定及计数、无菌操作技术。专业部分为微生物在特定专业领域的应用知识及实验方法：由于我院教学对象为制药工程专业的学生，因此设定了微生物育种与保藏、微生物的扩大培养、发酵工艺优化等专业相关知识技能的训练。同样的，若对于环境工程专业的学生，应该讲授一些与环境相关的知识，比如环境因素对微生物的影响，微生物与环境修复以及微生物与环境检测等。对于食品工程专业的学生，则应该讲授的实验内容包括：食品中微生物的检测、食品在自然发酵和酸败过程中微生物的作用等内容。

二“、理论实验一体化”整合教学内容

微生物学是一门实验性和应用性很强的学科，微生物学实验是该门课程的重要组成部分，实验课的设置目的是使学生对微生物学的认识从理性上升为感性，在充分理解、掌握理论知识的基础上，提高学生们的操作技能。微生物学教学传统的教学模式是理论教学与实验教学分段进行，即理论讲授到一定的阶段后进入到实验教学中。这种教学模式优点是能突出理论知识的系统性和完整性，并对后续的实验教学起到较好的理论指导作用。但这种这种重理论系统完整性，而轻实践技能的培养模式，已不能更好地满足当今社会对高职院校人才的具有良好的实践能力的要求。我们将实验技术及相关理论知识按相关性原则进行了一体化整合，在满足实用、可接受深度原则的前提下，对一些对学生将来相关工作技能形成相关性不大的专业理论大胆舍弃，采取边实验边讲授对应理论知识的教学策略，具体安排见表1。整合后的`教学实践利于同学们将理论知识与实践技能有机结合起来，使同学们既可以理解这些知识技能具体的应用，又会对理论知识有具象化的理解。微生物学是以实验为基础的科学，它的概念和规律是通过实验来形成的，微生物学实验是对课程理论的验证与升华，将实验教学与相应的理论内容结合，可以有效地提高微生物学教学效果。

三、以学生为主体，安排独立设计综合应用实验

传统的微生物教学内容安排彼此孤立，缺乏连贯性，造成学生的基本知识不扎实，基本技能训练少，基本技能掌握不牢固；再加上设计实验少，没有研究实验，学生的综合能力得不到有效的锻炼和培养，学生缺乏学习兴趣。因此在教学内容中加入了两个综合应用实验，要求学生分组独立设计完成，以达到学以致用的效果。每组学生自行查阅文献、进行独立设计、自行实验。在实验过程中，定期组织全班性的交流汇报，以便教师可以及时监督实验进度，对学生实验过程中出现的问题给出解决的建议；学生最后以论文的形式进行总结报告。学生不但通过设计完成工作任务融会贯通了相关的实验技术和理论知识，而且会提高实际工作能力。例如：学生在遇到问题时，需通过网络或图书馆查阅相关文献资料，学生的分析及自学能力得到提高。在实验计划实施过程中，不同学生可能面临并解决不同的问题，学生独立运用已有知识技能解决实际问题的能力增强、思维能力得以锻炼。实验中所需的材料的制作（例如无菌器材的准备、培养基的配置等）及实验操作均由学生自己完成，学生动手能力得到充分锻炼。实验以小组为单位完成，实验自始至终需要团队每名成员的参与，成员之间必须通力合作，确保实验顺利完成，培养了学生的团队工作意识。

需要指出的是，由于调动了学习兴趣和积极性，学生并没有因为需要课下花较多的精力来查找资料、设计实验、培养微生物，而产生怨言。学生不记名问卷调查结果也对这种改革后的教学方式表示欢迎。若要“以实际应用为导向、理论实验一体化教学、以学生为主体”的教学模式得以实施，需要系统性制订实验管理规范，全方位开放仪器设备与实验室时间，为实验教学提供制度保障。要求学生必须严格执行进出实验室登记、仪器设备使用登记、实验记录登记等规定，以便及时掌握实验室开放现状和仪器设备使用现状。同时，应该完善成绩评定制度。除传统的理论试卷考试和实验报告评定实验成绩外，将基础部分的操作技能考核、综合部分的实验设计及结果汇报表现均纳入最终的成绩评定。改变了以往学生死记硬背应付理论考试、抄袭结果应付实验考核的现状，促使学生能够认真练习，认真思考所学的知识技能。

微生物学课程的作用，一是为学生学习后续专业课程奠定理论与技能基础；二是为学生今后从事相关专业工作提供丰富的微生物学知识和实践技能。为了满足社会对相关人才的需求，高职院校的微生物教学绝不能沿袭传统的学科式的教学模式，怎样才能真正做到“以实际应用为导向、理论实验一体化教学、以学生为主体”，还需要大家逐步地探索与创新。今后我们会继续努力学习，提高自己的专业水平，并通过不断总结教学经验和改革尝试，进一步提高微生物学的教学水平，从而为培养具备较高微生物综合素质的应用型、高技能型人才而努力。

⬓ 细胞微生物检测员工作总结 ⬓

作为一名微生物检验员，有效的工作计划对于保证实验室的运行顺利和确保准确可靠的结果非常重要。一个好的工作计划可以帮助检验员高效地完成工作任务，提高工作效率，减少错误率。下面我将详细介绍一个典型的微生物检验员工作计划，希望对大家有所启发。

6:30-7:00：早晨准备

每天早上，作为一名微生物检验员，首先要保证自己身心状态良好。早晨起来后，洗漱完毕后，进行适量的运动、做一些呼吸操等，以促进血液循环，提高身体活力。查看前一晚进入培养箱或培养仪的培养物和培养基，确保其运行正常。

7:00-8:30：准备样品

在开始检验之前，必须准备好所有需要分析的样品。根据工单或工作指示，从冰箱或其他储存设备中取出所需的样品，并安排好样品的处理顺序。注意确保样品的完整性和标识的准确性，避免混淆。同时，检查实验室设备和试剂的完备性和有效性，做好相应的记录。

8:30-9:00：实验室准备

在开始实验之前，需要对实验室进行准备工作。包括清洗和消毒实验台、试剂瓶、玻璃仪器等实验器材。检查微生物培养基的制备情况，根据需要进行制备或消毒。同时，检查实验室的垃圾桶和危险废物容器是否已清空，以确保实验环境干净、卫生。

9:00-11:30：微生物分析

这个时间段是进行微生物分析的关键阶段。根据实验室工作指引和标准操作程序，完成微生物检验的各项操作。包括样品制备、培养基的制备和菌液的接种、平板计数、菌落的鉴定和鉴定，以及其他相关实验。在进行实验操作时，要认真遵循操作规范，注意实验室安全，防止交叉污染。

11:30-13:00：午餐休息

在上午工作临近结束时，放松一下心情是非常重要的。吃午饭、休息片刻，让自己恢复精力，以应对下午的工作。

13:00-15:30：结果记录和分析

下午工作的重点是将上午的实验结果进行记录和分析。将实验结果准确地记录在记录册或计算机数据库中，注意格式规范和语言清晰。对于阴性结果或阳性结果，及时进行分析和解释，并与实验目的进行比对，以确定样品的微生物质量。

15:30-16:00：实验数据整理和归档

下午工作的最后阶段是对实验数据进行整理和归档。确保记录的完整性和可追溯性，将实验数据按照规定的标准进行整理和归类。同时，根据实验室的要求，将相关记录归档，便于将来的查询和参考。

16:00-17:00：清洁和维护工作

在每天的工作结束时，对实验室进行清洁和维护工作非常重要。包括清洗实验仪器、试剂瓶和培养皿，消毒实验台和杂物桌面，清理垃圾和危险废物。维护好仪器设备的功能和状态，确保其长期可靠地运行。

以上是一个微生物检验员的典型工作计划，通过合理的时间安排和工作分配，可以提高工作效率，确保实验室的正常运行和高质量的实验结果。当然，每个实验室的具体要求和工作时间可能有所不同，检验员需要根据实际情况和工作安排合理调整自己的计划。但始终要牢记的是，科学准确和安全可靠是我们的座右铭。

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通过实习使学生将理性知识与感性认识有机地结合，将书本知识用于实验，在实验中更深地理解基础理论，提高学生的综合能力与创新意识。通过实习，掌握培养基的配制、分装及灭菌方法；掌握微生物的接种技术；掌握微生物的冷冻干燥保藏方法。

（1）注重微生物学基础实验技能的掌握与提高，克服盲目追求新颖而忽视基础的倾向；

（2）课程实习前要预习，明确每次实验的目的与基本步骤；

（3）在实验中要有严紧的科学态度，尊重事实与实验结果，要善于发现新现象；

（4）树立密切合作的风气，包括学生与老师、班与班、组与组、组长与组员之间的密切配合。

1、培养基的配制和灭菌。

2、微生物（金葡菌）的接种。

3、菌种的（金葡菌）的冷冻干燥保藏方法。

4、日程安排：

第一天实习课程的讲授；实习工具、仪器和设备的准备（包括培养基的配制、倒平板、金葡菌的活化、保护剂的配制）。

第二天金葡菌由固体培养基转接至液体培养基；准备第三天的实验器具。第三天菌种冻干前的预处理。第四天菌种的冻干操作。第五天冻干机关机，菌种保藏。

天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、分装架、移液枪、培养皿、玻璃棒、烧杯、试管架、剪刀、酒精灯、硅胶塞、线绳、报

纸、乳胶管、电炉、高压灭菌锅、干燥箱、牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、金葡菌斜面培养物、接种环、冻干机、西林瓶、离心机、生化培养箱等。

1.制备培养基

2.配制保护剂：鲜牛奶3000r/min离心30min，弃去上层脂肪，加9倍体积生理盐水，分装，121℃(或116℃)高压灭菌20min后备用。保护剂的作用可能是在冷冻干燥的脱水过程中代替结合水而稳定细胞成分(细胞膜)的构型，防止细胞膜因为冻结而破坏。保护剂还可以起支持作用，使微生物疏松地固定在上面。

3.包2根离心管、4根大枪头、2个西林瓶、1根8ml生理盐水、1根保护剂，121℃灭菌20min。

4.把菌种从平板培养物接种至平板培养基（菌种的活化）：

（1）把接种环放在酒精灯上消毒，消毒时应使接种环完全烧红；

（2）待接种环冷却后，用接种环从平板上沾取少许菌苔；

（3）然后用接种环在平板培养基上画线；

（4）把平板培养基拿去37℃培养24h

5.把菌种从平板培养物接种至液体培养基（液体接种法）：

（1）用接种环从平板上沾取少许菌苔；

（2）在管内靠近液面试管壁上将菌苔轻轻研磨并轻轻振荡，或将接种环在液体内振摇几次；

（3）将液体肉汤培养基150r/min摇床37℃培养24h。

接种液体培养物时应特别注意勿使菌液溅在工作台上或其他器皿上，以免造成污染。如有溅污，可用酒精棉球灼烧灭菌后，再用消毒液擦净。凡吸过菌液的吸管或滴管，应立即放入盛有消毒液的容器内。

6.把灭菌物品烘干备用

7.拿出液体培养基：取出5ml菌液放入无菌离心管4000r/min离心20min，倾去上清液，再用5ml无菌生理盐水将菌泥重新悬浮，再次4000r/min离心20min，倾去上清液，用5ml灭菌保护剂将菌泥重新悬浮，之后就可以分装入西林瓶，每瓶1ml(液面高度3～5mm)。

8.预冻：分装好的菌种管放－80℃预冻2h，同时开启冻干机的制冷机，也可在冻干机的冷阱中预冻菌种。

9.冻干：当冻干机冷阱温度达到－40℃时，将预冻好的.西林瓶放进压盖干燥架中，

把假盖板放在冷阱上，再将干燥架放在冷阱上方，罩上压盖有机玻璃罩，罩下端要与“O”型密封圈完全接触。顺时针拧紧真空阀，按“真空计”键，显示真空度为100～110×103，再按“真空泵”键，真空泵工作（真空泵的盖子要打开），15Pa以下为正常，冻干开始。10.压盖：24h后，视感物料已完全干燥，按顺时针方向转动有机玻璃罩上方手柄，使罩中压盖架丝杠转动下移，将瓶盖压入瓶中，实现在真空中压盖。

11.关机：按逆时针方向打开真空阀充气，按“真空泵”键，真空泵停止运转。取下有机玻璃罩，拿出西林瓶保存。

需灭菌的物品应严格灭菌，避免污染杂菌；2.接种时应该要等接种环完全冷却后再接种；

3.冻干时，西林瓶的盖子一定要放好，即使西林瓶中的空气可以出来形成真空，又能在压盖的时候可以把盖子盖好。

上图中盖子已经掉了的和西林瓶中还是液体的都是实验失败的，盖子即没掉瓶子中的菌种又是粉末状的为实验成功的。

盖子掉了的：是因为抽气时，气流流动使瓶子掉下来。

瓶子中还是液体的：是因为盖子盖的太紧，瓶中的空气抽不出来，水分也没抽出，导致瓶子中的菌种未变成粉末状。

通过这个实习，掌握了培养基的配制、分装及灭菌方法；掌握了微生物的接种技术；掌握了微生物的冷冻干燥保藏方法。通过实习将理性知识与感性认识有机地结合，将书本知识用于实验，在实验中更深地理解基础理论，明白了需灭菌的物品应严格灭菌，避免污染杂。也让我的综合能力与创新意识得到了提高。

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一环境中的微生物的检测和分离纯化

实验目的：

1 学习并掌握无菌操作技术原理和方法

2 学习用稀释涂布法分离微生物

3 认识微生物存在的普遍性，体会无菌操作的原理

实验材料：

1 土样溶液0.5ml，无菌生理盐水

2 取液器(1000μL一支，100μL一支)，培养箱，培养皿(12个)，无菌有帽试管，三角瓶，无菌涂棒，接种环，1000μL无菌吸头若干，记号笔，酒精灯，火柴，试管架

实验步骤：

A培养基的制备(已提前制备好)

B周围环境中的微生物的检测，在牛肉膏蛋白胨培养基平板上作如下实验

豆浆、豆奶，均匀加在三个培养基上，并用无菌玻璃涂棒涂布均匀(要多涂几次，时间约1-2分钟，使细菌均匀分布)。 2 再取三个平板，三个同学分别用手指(未洗过)在培养基上涂抹几秒钟，一个同学对应一个平板。

3 再取一个平板，其中一个同学将手用肥皂洗过后，再在培养基上涂抹。

4 再取一个平板，打开皿盖，一个同学对着培养基咳嗽，使口腔中的气流和飞沫落到培养基上。

5 再取一个平板，打开皿盖，在空气中放置10min左右，关上皿盖。

6 将上述9个平板放置在35℃的培养箱中培养24h。

C土壤中分离微生物

1 采土样，制备土壤稀释液(已准备好)

2 取三个平板，每个培养基上用取液器添加100μL的土壤稀释液，并用无菌玻璃涂棒涂布均匀(要多涂几次，时间约1-2分钟，使细菌均匀分布)。

3 将平板依旧放在35℃的培养箱中培养24h。

D菌落计数

培养24h后，取出培养平板，算出每个平板上的菌落数量。其中，土样中的微生物含量可用以下式子计算

土壤中的细菌含量(个/g土壤)=菌落平均数×10×稀释倍数

实验结果及数据：

实验结果如附图。

开盖10min 手指直接按压

手指直接按压手指直接按压

1号的手指经肥皂洗后按压对着培养基咳嗽

豆奶河水

土壤溶液土壤溶液

豆浆土壤溶液

实验讨论及感想：

1根据你对周围环境中微生物存在的观察，你认为无菌操作要注意什么？

在进行无菌操作的时候，应该要注意始终在明火旁边操作，既不能离得太远，也不能离得太近。因为在明火旁边可以减少空气中的微生物进入操作器具中的概率。

2在日常生活中如何让讲究饮食和生活卫生？

生活中，剩菜剩饭应该存放在冰箱内或是干燥低温处，尽量避免适宜微生物生长繁殖环境。

3试解释夏天时煮好的饭如果放在锅中保持盖着锅盖不动，不容易变质，而一旦盛在碗里饭就容易变质，如果是吃剩的剩饭就更容易变质的原因。

煮好的饭由于高温，本身含有的微生物被杀死，保持盖着锅盖不动，外界的微生物难以进入，但是一旦盛在碗里，抑或是吃剩的剩饭，由于跟空气直接接触，大量微生物会在其表面生长繁殖，导致其变质。

4根据实验结果，试从微生物的角度批驳“洁癖行为”。

完全的洁癖行为是不存在的。就算东西收拾的再干净，也有无数肉眼看不见的微生物依然停留在器具表面，无法完全清除掉，所以，“洁癖行为”是永远无法达到的。

二固定化酵母细菌发酵啤酒实验与酸奶制作

实验目的：

1 了解固定化细胞技术的方法和意义

2 了解酵母发酵产生啤酒的过程

3 学习酸奶制作方法

4 了解纯种发酵和传统发酵在无菌操作方面的区别

实验材料：

1 无菌滴管，无菌封口膜封好的100ml三角瓶

2 发酵培养基：100ml8%-10%的麦芽汁装于250ml三角瓶中

3 浓度为2.5%的海藻酸钠溶液5ml，灭菌

4 浓度为1.5%的CaCl250ml，灭菌

5 浓度为0.9%的无菌生理盐水，5ml

6 袋装巴氏消毒的牛奶，

7 啤酒菌种：啤酒酵母

8 酸奶菌种：市售酸奶

实验步骤：

A固定化酵母细胞发酵啤酒

1 菌体培养：将培养了24h的新鲜斜面菌种接种于三角瓶中培养。

2 细胞固定化：在预热至35℃的海藻酸钠溶液中加入2ml预热至35℃的酵母培养液，混合均匀，以无菌滴管(离液面5cm以上，离液面太近无法制得凝胶珠)缓慢而稳定的滴入CaCl2溶液中，即可得到直径约为3mm左右的凝胶珠。注意无菌操作。钙化30分钟左右。 3 固定化细胞发酵啤酒：在无菌玻璃棒的帮助下倒掉CaCl2溶液，将生理盐水倒入制得的固定化好的酵母细胞的瓶子中，洗一次凝胶珠，倒掉生理盐水。将100ml发酵培养基(麦芽汁)倒入制得的固定化小球的瓶子中，用无菌封口膜封好瓶口。20-28℃静置培养24h。注意无菌操作。

4 放置在4℃的冰箱中冷藏一段时间，品尝啤酒。

B制作酸奶

1 取1000ml鲜奶搅拌煮沸消毒，加白糖60g搅拌溶解，乘热分装到干净无菌的.100ml三角瓶中，用无菌封口膜封好瓶口。让其自然冷却(冷却中最好能摇晃三角瓶2-3次，以免乳脂结皮)。用洁净的封口膜将三角瓶口盖住。冷至40℃(不烫手)时，取市面上销售的未经过灭菌的原味酸奶按5%(体积分数)比例倒入溶解好的糖的牛奶中，摇匀。

2 或直接把是受经过巴氏消毒的“无抗牛奶”分装到干净无菌的100ml三角瓶中，加入6%(质量分数)白糖，摇晃确保使糖分充分溶解，取市面上销售的未经过灭菌的原味酸奶按5%(体积分数)比例倒入溶解好糖的牛奶中，摇匀。三角瓶可用一次性纸杯或塑料杯代替，封口膜可用白纸代替。

3 在42℃的情况下，三角瓶(纸杯或塑料杯)静置发酵培养6-8h(如果用纸杯盛牛奶，白纸封口，由于传热慢，需要发酵10-12h)。牛奶变为不流动的酸奶时，停止发酵。 4 置于4℃的冰箱中24h以上，待冷却老熟后便得到酸奶。

5 品尝酸奶。

实验附图

我制作的酸奶

实验讨论及心得

我制作的酸奶

1 谈谈固定化细胞技术的意义。

固定化技术就是将生物酶或细胞固定在一定的基质上。与传统方法相比，该技术具有能多次使用菌体的特点，简化了操作步骤。

2 试述纯种发酵和传统发酵在无菌操作方面的差异。

纯种发酵对无菌操作的要求较高，因为是在成分单一的发酵基质中，仅接入一种微生物，通过对该种微生物的培养，得到纯度较高的单一性产物，所以对无菌操作的要求也较高一些。

3 为何有的同学用无菌滴管把海藻酸钙与酵母菌混合液滴加入CaCl2溶液时，未得到凝胶珠，而得到了不规则形状的固体？